FT110X台式快速萃取仪萃取法测定食品添加剂含量的方法验证

在采用FT110X台式快速萃取仪（基于加速溶剂萃取原理）建立食品添加剂含量测定方法时，需通过系统性验证确认方法的可靠性、准确性与适用性，以满足食品检测领域的技术规范（如 GB/T 27404、AOAC 标准等）。方法验证需围绕专属性、线性与范围、准确度、精密度、检出限与定量限、稳定性六大核心指标展开，结合FT110X的设备特性（高温高压萃取、密闭操作、参数可控）设计验证方案，具体内容如下：

一、专属性验证：确保目标添加剂无干扰检出

专属性旨在确认样品基质中其他成分（如食品中的蛋白质、脂肪、碳水化合物、天然色素等）不会对目标食品添加剂的提取与检测产生干扰，需结合FT110X台式快速萃取仪的萃取条件与后续检测仪器（如HPLC、GC）的分离能力设计验证实验。

先需制备三类溶液：一是纯品对照溶液（仅含目标食品添加剂标准品，用萃取溶剂配制），二是空白样品萃取液（选取不含目标添加剂的同类食品，按FT110X台式快速萃取仪的优化条件进行萃取，收集萃取液），三是加标空白样品萃取液（向空白样品中添加已知浓度的目标添加剂标准品，再经 FT110X 萃取）。通过对比三类溶液的色谱图（或其他检测信号图谱），观察目标添加剂的特征峰（或信号峰）是否与空白样品中的杂峰完全分离 —— 若空白样品萃取液在目标添加剂的保留时间处无明显峰形，且加标空白样品萃取液中目标峰的峰形、保留时间与纯品对照溶液一致，无峰重叠或基线干扰，则说明FT110X的萃取条件（如溶剂选择、温度压力参数）能有效排除基质干扰，仅特异性提取目标添加剂，满足专属性要求。

例如，在测定饮料中甜味剂（如三氯蔗糖）时，若空白饮料（未添加三氯蔗糖）的萃取液在三氯蔗糖的保留时间（如HPLC中8.5min）处无杂峰，而加标空白饮料的萃取液在该时间点出现与三氯蔗糖标准品一致的对称峰，则证明方法专属性合格。

二、线性与范围验证：确定添加剂浓度与检测信号的线性关系

线性与范围验证需确认目标食品添加剂的浓度在一定区间内，其检测信号（如色谱峰面积、吸光度）与浓度呈良好线性关系，同时明确方法的适用浓度范围（需覆盖食品中该添加剂的常规添加量与限量标准），为定量计算提供依据。

实验时，需选取5-7个浓度梯度的目标添加剂标准品，其中至低浓度接近后续确定的定量限，至高浓度不低于食品中该添加剂的限量值（或实际可能的适量添加量）。将各浓度标准品按FT110X台式快速萃取仪的优化萃取条件（模拟样品基质，可采用空白样品基质加标方式，避免溶剂效应）进行萃取，收集萃取液后用检测仪器测定信号值。以目标添加剂的浓度为横坐标（x），对应的信号值为纵坐标（y），采用最小二乘法进行线性回归，计算回归方程（y=ax+b）与相关系数（R2）。

若相关系数R2≥0.999（HPLC/GC检测通常要求），且各浓度点的实测信号值与回归方程计算值的偏差≤5%，则说明线性关系良好；同时，线性范围需覆盖食品中该添加剂的法定限量（如GB 2760中规定的用量上限）与实际检测需求（如低添加量样品的准确定量），例如测定糕点中防腐剂山梨酸钾时，线性范围可设定为0.05-5.0mg/kg（覆盖其在糕点中的限量0.075g/kg），确保不同添加量的样品均能在此范围内准确定量。

三、准确度验证：评估方法的实际测量误差

准确度反映方法测定结果与真实值的接近程度，通常通过加标回收率实验验证，需结合FT110X台式快速萃取仪的萃取效率（能否充分提取样品中的目标添加剂）设计加标水平。

实验选取不含目标添加剂的空白食品样品（或已知含量的阳性样品），按“低、中、高”三个加标水平添加目标添加剂标准品：低水平接近定量限，中水平为线性范围的中间浓度（或食品中常规添加量），高水平接近限量标准（或线性范围上限），每个水平平行制备3份样品。将加标样品经匀浆、研磨等前处理后，装入FT110X的萃取池，按优化条件（如溶剂配比、温度100-150℃、压力15-20MPa、萃取时间15-25min）进行萃取，收集萃取液后测定目标添加剂含量，计算回收率（回收率=（实测值-空白值）/加标量×100%）。

根据食品检测规范，多数食品添加剂的加标回收率需控制在 80%-120%（低浓度水平可放宽至70%-130%），且同一加标水平下3份样品的回收率相对标准偏差（RSD）≤10%，例如，测定酱腌菜中脱氢乙酸钠时，在0.1mg/kg（低）、0.5mg/kg（中）、1.0mg/kg（高）加标水平下，经 FT110X 萃取后的回收率若稳定在85%-115%，RSD≤8%，则说明方法准确度合格，能有效避免因萃取不完全或基质干扰导致的测量误差。

四、精密度验证：确认方法的重复性与再现性

精密度体现方法在相同条件下对同一样品重复测定的稳定性，需从重复性（同一实验室、同一操作人员、同一设备）与中间精密度（同一实验室、不同操作人员/不同时间、同一设备）两方面验证，核心是排除FT110X台式快速萃取仪操作参数波动（如温度压力微小偏差）或人为操作差异对结果的影响。

1. 重复性验证

选取同一批次的阳性食品样品（含目标添加剂，浓度处于线性范围中间水平），平行制备6份样品，由同一操作人员在同一时间，按FT110X台式快速萃取仪的固定萃取程序（参数不变）进行萃取，测定每份样品的目标添加剂含量，计算6次测定结果的平均值、标准偏差（SD）与相对标准偏差（RSD）。若RSD≤6%（HPLC/GC 检测常规要求），则说明方法重复性良好，FT110X的程序控制稳定性（如恒温恒压精度）能满足重复提取需求。

2. 中间精密度验证

由两名操作人员在不同日期（如间隔1-2天），对同一批次阳性样品各平行测定3份（共6份），同样按FT110X台式快速萃取仪的标准程序萃取，计算6次测定结果的总RSD。若总RSD≤8%，则说明即使存在操作人员更换或设备运行环境（如室温微小变化）的差异，方法仍能保持稳定，进一步证明FT110X 的参数可控性与操作便捷性（不同人员按标准程序操作即可获得一致结果）。

五、检出限（LOD）与定量限（LOQ）验证：确定方法的至低检测能力

检出限是方法能检出目标添加剂的至低浓度（仅需定性确认存在），定量限是能准确定量的至低浓度（需满足定量精度要求），两者需结合FT110X台式快速萃取仪的萃取效率与检测仪器的灵敏度确定，确保方法能覆盖食品中添加剂的痕量检测需求（如违规超微量添加场景）。

实验采用“空白样品加标法”：向空白食品样品中添加极低浓度的目标添加剂标准品（从接近预期 LOD 的浓度开始，逐步降低），经FT110X台式快速萃取仪萃取后测定信号值，以“3倍信噪比（S/N=3）”对应的浓度为检出限（LOD），“10倍信噪比（S/N=10）” 对应的浓度为定量限（LOQ）；同时，需对LOQ浓度的加标样品平行测定3份，确保其回收率在70%-130%、RSD≤15%，验证LOQ浓度下的定量准确性。

例如，测定婴幼儿配方食品中香兰素时，经FT110X萃取后，若S/N=3对应的浓度为0.01mg/kg（LOD），S/N=10 对应的浓度为0.03mg/kg（LOQ），且0.03mg/kg 加标样品的回收率为75%-125%、RSD≤12%，则说明方法能检出并准确定量极低浓度的香兰素，满足婴幼儿食品中严格的添加剂限量检测需求。

六、稳定性验证：确认萃取液与样品的储存稳定性

稳定性验证需确认两个环节：一是萃取液的短期稳定性（FT110X萃取后，萃取液在检测前的储存过程中是否发生目标添加剂降解或吸附），二是待萃取样品的稳定性（样品预处理后，在装入 FT110X 萃取池前的储存过程中是否稳定），避免因储存不当导致结果偏差。

1. 萃取液稳定性

将同一阳性样品经FT110X台式快速萃取仪萃取后的萃取液，按常规储存条件（如4℃冷藏、室温避光）分别在0h（立即检测）、2h、4h、8h、12h、24h时测定目标添加剂含量，计算不同时间点含量与0h含量的偏差。若偏差≤5%，则说明萃取液在24h内稳定，可满足批量样品检测时“集中萃取、分批测定”的需求（无需萃取后立即检测，提升操作灵活性）。

2. 待萃取样品稳定性

将预处理后的样品（如匀浆后的肉类样品、研磨后的谷物样品）在4℃冷藏条件下分别储存0h（立即萃取）、12h、24h、48h，按FT110X标准程序萃取并测定含量，计算不同储存时间的含量与0h 含量的偏差。若偏差≤8%，则说明待萃取样品可短期冷藏储存，方便实验室统筹样品处理顺序，无需担心样品变质或添加剂降解影响检测结果。

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